什么是RIA?
RIA的优势RIA 具有的桌面应用程序的特点包括:在消息确认和格式编排方面提供互动用户界面;在无刷新页面之下提供快捷的界面响应时间;提供通用的用户界面特性如拖放式(drag and drop)以及在线和离线操作能力。RIA具有的Web应用程序的特点包括如:立即部署、跨平台、采用逐步下载来检索内容和数据以及可以充分利用被广泛采纳的互联网标准。RIA具有通信的特点则包括实时互动的声音和图像。 客户机在RIA中的作用不仅是展示页面,它可以在幕后与用户请求异步地进行计算、传送和检索数据、显示集成的用户界面和综合使用声音和图像,这一切都可以在不依靠客户机连接的服务器或后端的情况下进行。 对于企业来说,部署RIA的好处在于:1)RIA可以继续使用现有的应用程序模型(包括J2EE和.NET),因而无需大规模替换现有的Web应用程序。通过Rich Client技术,可以轻松构建更为直观、易于使用、反应更迅速并且可以脱机使用的应用程序。 2)RIA可以帮助企业提供多元化的重要业务效益,包括产提高销量、提高品牌忠诚度、延长网站逗留时间、较频繁的重复访问、减少带宽成本、减少支持求助以及增强客户关系等。 RIA目前的发展态势在过去的两到三年中,Web开发人员一直是想构建一种比传统HTML更丰富的客户端:这是一个用户接口,它比用HTML能实现的接口更加健壮、反应更加灵敏和更具有令人感兴趣的可视化特性。RIA技术的出现允许我们在因特网上以一种像使用Web一样简单的方式来部署富客户端程序。无论将来RIA是否能够如人们所猜测的那样完全代替HTML应用系统,对于那些采用C/S架构的胖客户端技术运行复杂应用系统的机构和采用基于B/S架构的瘦客户端技术部署Web应用系统地机构来说,RIA确实提供了一种廉价的选择。下面介绍一下目前出现的几种比较有实力或者有特点的RIA客户端开发技术: 1) Macromedia Flash/FlexFlash 从6.0开始Flash就逐步具备建立窗体风格的应用程序的功能。据Macromedia称已经有98%以上的桌面系统的浏览器都安装了 Macromedia Flash Player。这使得以Macromedia Flash Player为客户端的RIA可以支持种类广泛的平台和设备。Flex是为满足希望开发 RIA的企业级程序员的需求而推出的表示服务器和应用程序框架,它可以运行于J2EE和.NET平台。Flex表示服务器提供基于标准的、声明性的编程方法和流程,并提供运行时服务,用于开发和部署丰富客户端应用程序的表示层。Flex开发者使用直观的基于XML的MXML来定义丰富的用户界面。该语言由 Flex服务器翻译成SWF格式的客户端应用程序,在Flash Player中运行。 2) LaszloLaszlo 是一个开源的RIA开发环境。使用Laszlo平台时,开发者只需编写名为LZX的描述语言(其中整合了XML和Javascript),运行在J2EE 应用服务器上的Laszlo平台会将其编译成SWF格式的文件并传输给客户端展示。从这点上来说,Laszlo的本质和Flex是一样的。Flash是任何浏览器都支持的展示形式,从而一举解决了浏览器之间的移植问题。而且,在未来的计划中,Laszlo还可以将LZX编译成Java或.NET本地代码,从而大大提高运行效率。 3) AvalonMicrosoft的Avalon是下一版本的 Windows(代号"Longhorn")的一部分,是一个图形和展示引擎,主要由新加到.NET框架中的一组类集合而成。Avalon定义了一个在 Longhorn中使用的新标记语言,其代号为"XAML"(可扩展应用程序标记语言)。可以使用XAML来定义文本、图像和控件的布局,程序代码可以直接嵌入到XAML中,也可以将它保留在一个单独的文件内。这与Flex中的MXML或者Laszlo中的LZX非常相似。不同的是:基于 Avalon的应用程序必须运行在Longhorn环境中,而Flex和Laszlo是不依赖于平台的,仅仅需要装有Flash播放器的浏览器即可。 4) Java SWTJava 已经出现几年了,并且完全支持创建基于窗体的用户界面。除了Java基础类(JFC/Swing)中的用户界面组件之外,开发人员还可以使用来自于 Eclipse Project的SWT工具箱和许多第三方工具箱进行开发。对于图形来说,可以采用Java 2D API:一个非常完整且非常复杂的图形API。你可以通过一个Web浏览器使用Java插件软件,或使用Java运行时环境中较新的Java Web Start技术来部署应用程序。使用Java建立Rich Client的主要缺陷是它的复杂性(即使对简单的窗体和图形也要求编写非常烦琐的代码)和Java浏览器插件的低市场占有率。 5) XULXUL (念作"zool")是一种基于XML的用户界面语言,它来自于Mozilla的开放源码项目。它可用于建立窗体应用程序,这些应用程序不但可以在 Mozilla浏览器上运行,而且也可以运行在其他描述引擎上,如Zulu(一个Flash MX组件)和Thinleys(一个Java实现)。XUL描述引擎都非常小(100K以下),它可以使用XML数据也可以生成XML数据。XUL的一个主要缺点在于它目前还没有获得一个主要商业实体的支持。XUL最大的优点在于它与Gecko引擎的集成(打开了通向大量Web标准的大门),以及与大多数其它XML用户界面描述语言相比它是一种非常具有表达力和简洁的语言。 6) BindowsBindow 是用Javascript和DHTML开发的Web窗体框架。Javascript用于客户端界面的显示和处理,XMLHTTP用于客户端与服务器的信息传输。Javascript在客户端的表现力不容置疑,利用Javascript几乎可以实现Windows应用程序所能干的大部分事情,XMLHTTP 一直以来常被用于实现"无刷新"的Web页面,它和 Javascript配合,可以完成数据从服务器和客户端的传输。Bindows的一个主要的缺点是它采用一次全部载入的方式来实现脚本库,在窗口的加载期,需要一个漫长的等待过程,甚至浏览器的进程会产生无响应的情况。这点Bindows根本没有遵循"用多少去多少"的准则。另外,内部大量利用了IE6 的技术,没有考虑到非IE的浏览器,限制了Bindows的流行。 RIA未来的发展预测就目前RIA的使用情况来说,离"RIA时代"还有很远的一段距离。今后几年时间内传统的Web应用程序和RIA将会共存。笔者认为真正具有实力担当起普及丰富客户端应用重任的只有基于Flash Player的Flash/Flex应用程序和Microsoft的基于Avalon的应用程序。短期时间内(估计2-3年时间)可能是 Flash/Flex应用程序在新兴的网络应用程序市场上占有主导地位。随着时间的推移,Flash/Flex应用程序的市场占有率可能会慢慢被基于 Avalon的应用程序所蚕食。当然,Flash Player和Flex以后也会不断推出新版本,相对于升级操作系统或安装Avalon运行环境,人们肯定更愿意升级Flash Player。Flash/Flex应用程序也有其本身固有的软肋,Flash Player的执行效率和对本地资源的操作限制是无法和Avalon相比的,相对于浏览器中的插件而言,Avalon的应用程序拥有更加广阔的可操作空间和更高的执行效率。 目前Microsoft还在推广一种叫做Smart Client(智能客户端)的客户端程序技术,Microsoft称Smart Client是比Rich Client更优秀的客户端,因而采用Smart Client的应用程序算不算RIA目前我个人还无法作答。这里我们之所以提及Smart Client,是因为Smart Client的特性跟我们谈的Rich Client有太多的相似之处。Smart Client拥有自动更新、离线状态下的数据处理和可以使用本地资源等特征,其中的可使用本地资源这一项无疑是一大卖点,因为浏览器中的 Flash/Flex应用程序目前还无法操作本地的一些资源,比如Flash/Flex应用程序无法将网上的文件保存到本地或者修改本地文件。虽然 Macromedia的Central1.5已经可以对本地文件进行简单的操作,并且flex1.5开发的RIA也能够运行于Central上,但是如何使Central能够得到大范围推广还是个问题。相对于轻量级的Rich Client,Smart Client更接近C/S架构中的客户端程序。Rich Client和Smart Client的定位还是有所区别的:Rich Client更适合作为轻量级的基于浏览器的网络应用程序客户端;Smart Client更适合作为Windows桌面应用程序的智能客户端。 不管我们今天称之为的RIA今后会不会成为主流应用程序,人们对开发具有高度互动性、丰富用户体验以及功能强大的客户端的追求是不变的。有理由相信,拥有成熟技术和极高市场占有率的Flash客户端将会在RIA道路上越走越远。
RIA的发展态势
在过去的两到三年中,Web开发人员一直是想构建一种比传统HTML更丰富的客户端:这是一个用户接口,它比用HTML能实现的接口更加健壮、反应更加灵敏和更具有令人感兴趣的可视化特性。RIA技术的出现允许我们在因特网上以一种像使用Web一样简单的方式来部署富客户端程序。无论将来RIA是否能够如人们所猜测的那样完全代替HTML应用系统,对于那些采用C/S架构的胖客户端技术运行复杂应用系统的机构和采用基于B/S架构的瘦客户端技术部署Web应用系统的机构来说,RIA确实提供了一种廉价的选择。下面介绍一下目前出现的几种比较有实力或者有特点的RIA客户端开发技术: Flash 从6.0开始Flash就逐步具备建立窗体风格的应用程序的功能。据Adobe称已经有98%以上的桌面系统的浏览器都安装了 Adobe Flash Player。这使得以Adobe Flash Player为客户端的RIA可以支持种类广泛的平台和设备。Flex是为满足希望开发 RIA的企业级程序员的需求而推出的表示服务器和应用程序框架,它可以运行于J2EE和.NET平台。Flex表示服务器提供基于标准的、声明性的编程方法和流程,并提供运行时服务,用于开发和部署丰富客户端应用程序的表示层。Flex开发者使用直观的基于XML的MXML来定义丰富的用户界面。该语言由 Flex服务器翻译成SWF格式的客户端应用程序,在Flash Player中运行。 2008年12月05日 Sun微系统公司今天正式发布了基于Java语言的平台JavaFX 1.0,这个平台建立在其广泛应用的Java编程语言的基础上,旨在建立大量可在电脑和手机上运行的网络程序。 Java一直以来就是编程语言,但是随着JavaFX的发布,Sun公司开始允许将编程内容创新这一任务转移到以设计艺术为重点而非编程科学为重点的设计人员身上。“我们的目标群体是叫做创造者的人群”,Sun公司Java平台组的高级副主任 OctavianTanase对 说,“随着1.0版的发布,我们将目标锁定在网页开发人员,这群可能拓展Java界面体验的人。到2011年,主要的目标是大量使用诸如Adobe系统等设计工具的设计人员”。当然,通向这个以设计为导向的工具还需要一些时间。Sun公司最后打算提供自己的程序给设计人员来建立RIAS,但是直到如今,这些设计人员还得使用程序员所使用的Netbeans或Eclipse集成开发环境(IDE)。新工具将在来年夏天面市。 Curl诞生于1995年的美国,Curl是由美国国防部高级研究项目代理资助,马萨诸塞州科技学院的David A. Kranz开发的Web开发语言, HTML语言的创建者Tim Berners-Lee也参与其中,并扮演了重要的角色。该语言的目标是用一种统一的面向对象的语言代替HTML、Cascading Style Sheets、JavaScript等;仅使用Curl便可开发出Web应用的各种软件;Curl程序在浏览器中运行,并且因为它以类似JRE的形式提供了客户端运行环境Surge RTE,能够轻松开发出日益流行的Rich Client应用程序。Curl是为了实现富客户端(rich client)应运而生的Web开发语言, 仅仅从其外观的丰富性上就能体现其富客户端理念。为了实现真正有益的富客户端,它能有效地实现各种复杂处理,具备提供高信赖、高扩展性、高维护性的应用程序所应拥有的各种编码能力。其拥有在Web环境上便利的分配、管理以及低廉的维护费以及在C/S环境上的用户便利性、迅速的应答,华丽的图像显示等众多优点于一身。Curl语言于2002年在美国正式开始商业化,在美国和日本拥有重多的客户和合作伙伴,现已进军北美及韩国市场,发展势头迅猛。 微软在Mix07上发布一些重大通告,其中最值得关注的就是SilverLight的发布,SilverLight的前身就是WPF/E技术,SilverLight就是微软新Windows图形子系统“Windows Presentation Foundation”(代号Avalon)的一个子集。这是一种新的Web 呈现技术的名称,创建该技术的目的是使其能够在各种平台上运行。该技术支持创建丰富的、具有绚丽视觉效果的交互式体验,并且可以随处实现:无论是在浏览器内、在多个设备上还是在桌面操作系统(如 Apple Macintosh)中。可扩展应用程序标记语言(XAML) 遵循 Windows 演示基础 (WPF),前者是”WPF/E”呈现功能的基础。XAML 是Microsoft .NET Framework3.0(Windows 编程基础结构)中的呈现技术。 MUILIB是国内推出的第一款RIA技术解决方案,它通过传统的Win32 C++开发技术搭配XML构建的界面,达到客户端界面强大的用户视觉体验和人机交互性,由于采用的是C++技术,所以不管是功能上还是性能上对比其他语言的解决方案都有绝对的领先优势。
ria是什么意思
含义:生育女神生育女神拉丁化形式的希腊'Pεια(Rheia),意思未知,可能与“ρεω(rheo)”流动“或ερα(时代)”地面“有关。在希腊神话里,丽亚是一个巨人,克鲁纳斯的妻子,宙斯,波塞冬,冥王星,赫拉,德米特和希斯蒂亚的母亲。此外,在罗马神话中,一个名为丽亚·西尔维亚(Rhea Silvia)的女人是罗穆卢斯和罗马的传奇创始人雷穆斯的母亲。名字印象:反应灵敏,有分析头脑,聪明,多才多艺,有抱负,不喜欢胸无大志的人。有领导才干,不满足身处从属地位。热爱自由。Rhea和Ria的区别为:来源语种不同、名字含义不同、名字寓意不同。一、来源语种不同1、Rhea:来自法语、德语。2、Ria:来自盖尔语。二、名字含义不同1、Rhea:这个名字的意思是“强大的领导者”。关联:强大,领导。2、Ria:作为女孩的名字是威尔士和爱尔兰派生,和名字丽安意味着“伟大的女王或女神”。Rianne是Rhiannon(威尔士语)的版本。
简介免疫分析技术
免疫技术为20世纪90年代优先研究、开发和利用的农药残留分析技术,世界粮农组织(FAO)已向许多国家推荐此项技术。免疫分析法(immunoassay,IA)是将免疫反应与现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫分析法是生物酶技术、荧光光谱技术、辐射技术、免疫分析技术应用于农药残留分析领域的一门新技术,是基于抗原和抗体之间的特异性识别和结合反应为基础的一种微量分析方法。免疫是机体识别和排除进人体内的抗原性异物的保护性应答反应。较大分子的农药可以直接作为抗原进入脊椎动物的体内产生免疫应答,从而得到可以和该农药分子特异性结合的抗体;小分子量的农药(相对分子质量<2500)一般不具备免疫原性,不能刺激动物产生免疫反应,但有与相应抗体在体外发生吸附反应的能力,即有反应原性,这类小分子物质在免疫学上称为半抗原。农药是半抗原,一般不具备抗原性,不能刺激动物产生免疫反应,需要首先将该小分子通过与一定碳链长度、大分子的载体蛋白质(通常使用牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、卵清蛋白)以共价键偶联制备成人工抗原,使动物产生免疫反应,产生识别该农药并与之特异性结合的抗体。以共价键偶联成人工抗原使动物产生免疫反应从而产生识别该农药并与之相结合的抗体(多克隆抗体),通过对半抗原或抗体进行标记(酶、荧光物质、放射性同位素等),利用标记物的生物、物理、化学放大作用,对样品中的特定的农药残留进行定性或定量检测。通过对半抗原或抗体进行标记(放射性核素、酶、荧光素标记等),利用标记物的生物或物理或化学放大作用来进行工作,它集测定的高灵敏性和抗体反应的强特异性于一体。它的开发过程需要投入较多资金和较长时间,但具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点。目前多用于单一农药残留检测,不适合应用于多残留检测。1971年Ercegovich[坞。]最先讨论了农药DDT、马拉硫磷及氨三唑(amino—triazole)的免疫测定。随后,大量研究免疫分析法在农药残留中的应用。Kun等报道了利用免疫分析测定对硫磷杀虫剂农药残留,最低检测限达到26ng/mL,相对标准偏差小于10
9/6。Laura等[坞0]报道利用化学发光免疫分析(cL—IA)测定农药残留。Anne等报道用非同位素免疫分析法(cMIA)测定氯麦隆杀虫剂,采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)作为检测器,极大提高灵敏度。农药残留的免疫学技术检测食品的范围很广,包括水果、蔬菜、饮料、啤酒、葡萄酒、乳、肉、动植物油、蜂蜜、豆类、谷物等。一些商品化的试剂盒也相继开发出来。国家农业部环保所李治祥和黄土忠于1990年研制了农药残毒速测箱,其原理就是有机磷和氨基甲酸酯类农药对动物和昆虫的致毒作用是通过特异性抑制胆碱酯酶(chE)来实现的。将chE与样品提取液反应,若chE受到抑制,表明样品提取液中含有OPS和氨基甲酸酯类农药,这时基质不能水解,就不能变色;否则ChE不受到抑制,基质水解产生蓝色。另外,国外还推出了多种酶标试剂盒应用于常规分析及田间检测的快速筛选,作为仪器分析的辅助方法发挥了一定的作用。免疫分析法作为农药残留快速筛选检测方法受到重视。 更多相关资讯/技术资料,请参考国家标准物质网www.rmhot.com.
蔬菜中有机磷农药残留的检测
运用气相色谱法。气相色谱法:用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法,适用于检测容易挥发而不发生分解的有机化合物。在气相色谱分析中会使用各种高灵敏度的检测器,比较常用的包括FPD(火焰光度检测器)、ECD(电子俘获检测器)、NPD(氮磷检测器)等。FPD是一种对硫、磷有选择性的检测器,这两种元素在燃烧中被激发,从而发射特征的光信号,因此通常我们在检测果蔬中有机磷类的农药残留时,便会选择用FPD来检测。ECD通常用来检测具有电负性的物质,而且电负性越强,灵敏度越高。在果蔬中的农药残留检测中,ECD被广泛应用于有机氯类农药的检测。
进行ria测定不需要哪种条件
进行ria测定不需要无菌条件。ria是一种利用放射性标记物和抗体相互作用来检测物质的方法。在ria测定中,需要使用放射性标记的物质和抗体,但不需要无菌条件。这是因ria测定是一种体外检测方法,不需要对生物样本进行培养和处理,且标记物和抗体都是经过严格的消毒和质量控制的,不会引入额外的细菌或污染。因此,进行ria测定不需要无菌条件。虽然进行ria测定不需要无菌条件,但在实验室中进行任何实验都需要注意实验室卫生和安全。
RIA技术的RIA的定义
RIA是Rich Internet Applications的缩写,翻译成中文为富因特网应用程序(Macromedia中文网站翻译为Rich Internet应用程序)。传统网络程序的开发是基于页面的、服务器端数据传递的模式,把网络程序的表示层建立于HTML页面之上,而HTML是适合于文本的,传统的基于页面的系统已经渐渐不能满足网络浏览者的更高的、全方位的体验要求了,这就是被Macromedia公司称之为的“体验问题”(Experience Matters),而富因特网应用程序(Rich Internet Applications,缩写为RIA)的出现也就是为了解决这个问题。RIA(Rich Internet Application,富互联网应用系统)技术允许我们在因特网上以一种象使用Web一样简单的方式来部署富客户端程序。这是一个用户接口,它比用HTML能实现的接口更加健壮、反应更加灵敏和更具有令人感兴趣的可视化特性。无论将来RIA是否能够如人们所猜测的那样完全代替HTML应用系统,对于那些采用胖客户端技术运行复杂应用系统的机构来说,RIA确实提供了一种廉价的选择。
什么是放射性配基?
放射性配基是核医学的一种。核医学是研究核素、核射线及其在医学领域中应用的学科。
根据核医学的研究内容、研究手段和研究对象的不同,又可以将核医学分为:临床核医学、实验核医学(又称基础核医学)和分子核医学三个大类。临床核医学主要是应用核素、核射线和核仪器对病人进行诊断和治疗;基础核医学是应用核素、核射线和核仪器进行医学基础理论和药物作用机理研究;而分子核医学根据核素的“分子”示踪原理,从细胞结构、生物化学反应及代谢等方面,在分子生物学、分子遗传学等分子医学水平上,揭示疾病的病因、病机、治疗及疗效和机理。临床核医学、实验核医学、分子核医学之间虽然有差异,但是,他们的共同点都是以原子核物理为基础。为此,他们相互依存、相互渗透,共同构成了核医学的整体。在中医的临床和基础研究中最早引用,并在实际中广泛应用的是实验核医学和分子核医学。
由于微电子技术、分子生物学技术、基因工程和结构生物学等高新科学技术的发展,电子计算机、单克隆抗体等的出现,核仪器和试剂等有关核医学技术和方法迅速更新。核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)、正电子发射计算机断层(Positron Emission Computed Tomegraphy,PECT)、放射免疫显影(Radioimmune Image,RII)、放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA)、免疫放射分析(Immunoradiometric Assay,IRMA)等新仪器、新技术和新方法的建立和发展,使核医学对疾病早期诊断、早期治疗的优点更加突出。核医学在分子水平、基因水平上对疾病的诊断和治疗,使诊断更加迅速、灵敏和准确,使治疗更加有效,使基础医学研究如虎添翼。
6.7.1核医学的主要研究方法
目前核医学应用和研究的范畴主要有临床核医学、实验核医学和分子核医学三个方面。限于篇幅,本章重点介绍中医基础理论和临床研究中经常使用的实验核医学和分子核医学的主要方法及其原理。
6.7.1.1实验核医学
在中医临床和基础理论研究中,经常使用的核医学方法有:放射免疫分析(RIA)、免疫放射分析(IRMA)、受体放射性配基结合分析(Receptor Radio-ligand Banding Assay, RRLBA)、放射自显影(Autoradiography, ARG)、同位素视踪(Isotopic, IT)等技术,以及以IT为原理而建立的同位素渗入法测定细胞免疫功能等各种方法。这里重点介绍RIA、IRMA 和RRLBA的基本原理。
1.放射免疫分析的基本原理
RIA属于竞争免疫分析法,也称“标记分析物”技术(Ekins,1987)。其原理是:放射性标记抗原与非标记抗原同时竞争抗体上的有限位点,然后将结合与未结合的游离抗原分离,用液体闪烁仪或γ-计数仪测定其放射性分布,绘制标准曲线,从标准曲线中计算待测样本的含量。RIA的基本原理通常可以用以下公式表示:
Ag*+Ab ↔ Ag*-Ab (1)
+
Ag
↕
Ag-Ab
式(1)中Ag*为标记抗原,Ab为特异性抗体,Ag*-Ab为标记抗原和特异性抗体结合的复合物,Ag是非标记抗原,可以是标准品,也可以是与标准品相似的被测物。在RIA反应体系中抗体的结合位点是有限的,Ag*与Ag和Ab的结合能力是相同的。Ag*与Ab的结合与Ag的含量密切相关,遵守化学反应中的质量作用定律。也就是说,随着Ag量的增加,Ag-Ab结合增加,Ag*-Ab结合必然减少。Ekins等人建立了RIA的数学模式,推导出RIA的反应式:
K1
Ag+Ab ↔ AgAb (2)
K-1
式(2)中K1为结合速率常数,K-1为解离速率常数。当反应达到平衡时,
K=K1/K-1=(AgAb)/(Ag)(Ab) (3)
式(3)中K为亲和常数,将式(2)代入式(3)中,推导出:
b/f=(AgAb)/(Ag)=K(Ab) (4)
b/f=K(AbT-B) (5)
式(4)中b/f为结合抗原与游离抗原的比率,式(5)中AbT=Ab+AgAb,为抗体的总浓度,AgT=Ag+AgAb(式5中未见,原稿同),为抗原的总浓度,B为结合的抗原浓度。从式(5)中导出:b/f与结合抗原B的浓度之间存在线性关系。若以抗原浓度为横坐标,以b/f或抗原结合率为纵坐标即可绘制RIA的标准曲线。现在出售的液体闪烁仪和γ-计数仪都带有RIA的各种计算软件,即可以由计算机绘制标准曲线,并直接给出样本的数据。
2.免疫放射分析法基本原理
IRMA与RIA的基本原理相似,其不同之处是RIA是用同位素标记抗原,而IRMA是标记抗体。尤其是单克隆抗体的出现,使IRMA迅速发展。由于标记的抗体可以与固体支持物以物理方法结合,使IRMA在分离结合与游离的抗原抗体复合物时变得简单、快速、准确,提高了工作效率和测量结果的精密度。
3.受体放射性配基结合分析的基本原理
受体是细胞膜或细胞内一些能与生物活性分子,如神经递质、激素、蛋白质抗原以及药物或毒素等相互作用的大分子。它们是一类具有结合和识别能力、信号传导能力并产生生物效应的多肽或蛋白质。受体的概念早在1878年Langkey就提出了。但是,直到20世纪30年代,Clark研究乙酰胆碱对蛙心的作用,发现了剂量-效应曲线,才初步确定了受体反应的基本原理。其反应方程式如下:
K1
R+L↔ RL (6)
K-1
式(6)中R代表受体分子,是Receptor的缩写。L代表与R结合的配基,是Ligand的缩写。K1是结合速度常数,K-1是解离速度常数。当反应达到平衡时,
K=K1/K-1=(RL)/(R)(L) (7)
式(7)中K为亲和常数,表示受体与配基的结合,与RIA一样,也遵守质量作用规律。因为受体的数目是有限的,可以被非放射性配基所饱和,因此在一定范围内,受体的数目可以由其与放射性配基的结合量计算出。
由于受体的放射性配基大多是氚标记物,因此,常用液体闪烁仪测量其放射性分布。新的液体闪烁仪都带有各种受体放射性配基结合分析的软件,可以由计算机直接给出数据。如果测定每个样本的饱和曲线,可以计算出该受体的结和容量(Rt)。当样本量少,可用单点法测量样本的Rt值。受体的单点测量公式如下:
Rt=(样本管平均cpm-NSB管平均cpm )/(仪器测量效率%×配基比活度×样本蛋白质含量×样本反应体积) (8)
单位以fmol/mg蛋白表示。
式(8)中cpm为放射性配基每分钟脉冲数;NSB为非特异性结合管;配基比活度可以从所购放射性配基说明书中查出;仪器测量效率由标准品测量参数给出;蛋白质含量是样本工作液的实际蛋白质含量,可按常用生化方法测量;反应体积是指反应样本管的总体积。Rt值一般以fmol/mg蛋白表示。
4.标记免疫分析进展
RIA和RRLBA所用的标记物是同位素,所用的结合物是抗体和受体。由于同位素标记物对环境造成的污染不容忽视,促使科技工作者寻找其灵敏度可与同位素标记物媲美,而又不造成或减少环境污染的标记物。在这期间科学家使用酶标记技术、荧光标记技术及荧光偏振等标记技术。这些标记技术在用于标记免疫分析时,大大减少了放射性核素对环境的污染。但是,因为测量的灵敏度和稳定性较RIA、RRLBA差,以及许多生物活性物质还不能用酶标记及荧光标记技术测量,又给科学家提出了寻找新标记技术的课题。1976年Schroeder用化学发光标记技术建立了竞争性蛋白结合法测定生物素后,次年他和Halman又分别用化学发光免疫分析测定了甲状腺素(T4)。此后,化学发光免疫分析迅速发展。尤其是利用蛋白质工程及基因工程生产出单克隆抗体和抗体结合片段后,使化学发光免疫分析扩大到分析小分子抗原,尤其是甾体激素测定的所有样本。化学发光免疫分析技术体现了灵敏度高、稳定性好、重复性佳等优点,又增加了样本测量的全自动化进程。由于操作简单、样本用量少、测量速度快等优点,很受临床研究及临床检验单位的欢迎。
化学发光免疫分析可分为竞争性和非竞争性发光免疫分析,它们的原理可用以下公式表示:
Ag+Ag-L+Ab↔ Ag-Ab+Ag-Ab-L (9)
式(9)中Ag代表抗原,Ab代表抗体,而Ag-Ab为抗原抗体复合物,Ag-L为发光物质标记的抗原,L为发光物质,Ag-Ab-L为抗原抗体发光物质的复合物。
非竞争性化学发光免疫分析原理:
sp-Ab+Ag↔sp-Ab-Ag (10)
sp-Ab-Ag+Ab-L↔sp-Ab-Ag-L (11)
式(10)和(11)中,sp为固相载体,sp-Ab代表将Ab与固相载体偶联,sp-Ab-Ag代表抗原抗体结合后仍与固相载体偶联,而Ab-L为发光物质标记的抗体,sp-Ab-Ag-L 为抗原抗体与发光物质复合物与固相载体偶联。
免疫放射学与放射免疫学啥区别
免疫放射学与放射免疫学的区别如下:免疫放射学(IRMA),放射免疫学(RIA)。标准曲线的工作浓度不同:RIA的工作范围为2~3个数量级,而RIMA可达3个数量级以上。应用不同:在RIA中应用的多为克隆抗体,亲和力和特异性要求较高,但用量很少。IRMA中标记抗体和固相抗体用量较多,一般均用来源丰富、特异性较高的单克隆抗体。反应模式不同:RIA为竞争抑制,测得放射性的量与受检抗原呈反比。IRMA为非竞争结合,剂量反应曲线为正相关的直线关系。