初次应答和再次应答抗体产生的区别
从以下几个方面：\x0d\x0a\x0d\x0a1、潜伏期长短不同，初次应答潜伏期较长，再次应答潜伏期显著缩短2、抗体种类不同，初次应答产生最早的抗体为IgM，再次应答产生的抗体大部分为IgG，而IgM很少。\x0d\x0a\x0d\x0a3、抗体量不同，初次应答产生的抗体总量比再次应答产生抗体含量少量。\x0d\x0a\x0d\x0a4、抗原不同，初次应答为TD和TI抗原，再次应答为TD抗原。\x0d\x0a\x0d\x0a5、抗体亲和力不同，初次应答低，后者高。
如何测定抗体
在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法，如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法（SPRIA）等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法，这是目前国际上流行的方法，该方法灵敏，客观。
另外测亲和力之前最好先测定抗体的有效浓度，方法是夹心法，用标准免疫球蛋白做标准品。因为在作OD-抗体浓度曲线时如果抗体浓度不够，做不出来好的S形曲线，达不到最高值。所以建议你先测定抗体的浓度。如果浓度较低的话，你可以浓缩一下，方法很多，如PEG法，真空冷冻干燥，超速离心等等。
初次应答产生的抗体与再次应答产生的有何区别？
从以下几个方面：
1、潜伏期长短不同，初次应答潜伏期较长，再次应答潜伏期显著缩短
2、抗体种类不同，初次应答产生最早的抗体为IgM，再次应答产生的抗体大部分为IgG，而IgM很少。
3、抗体量不同，初次应答产生的抗体总量比再次应答产生抗体含量少量。
4、抗原不同，初次应答为TD和TI抗原，再次应答为TD抗原。
5、抗体亲和力不同，初次应答低，后者高。
风疹病毒抗体igg值多少正常
IGG代表你已经感染了，IGM代表你近期感染，或正在感染，我老婆和你情况一样，不知道你有没有怀孕，如果刚怀上3个月内，医生会建议你打掉，你的检查结果，一般医生会叫你过半个月再检查一次，如果你没有怀孕那就更好，先治疗好再怀BB，风疹病毒IGG，你已经感染了，身体也有了免疫，以后不会再发这种病，关于巨细胞病毒是可以治疗的，问题是不知道你有没有怀上BB，没有就好，风疹病毒和巨细胞病毒，你可以到网上查下症状，及表现，风疹病毒一般小时候会得到这种病，和麻疹有点像，表现为低热，皮痒，淋巴肿大，一般3天会消失，和感冒差不多，国内大部分的人都得过这种病，不用太担心，巨细胞病毒，对孕妇伤害比较大，很容易导致小孩畸形，什么智力低下，听力问题，视力问题，先天性心胀病，过半个月你再去复查一下。aware可自测不用抽血祝您健康天 猫！
风疹病毒igg抗体值高于参考值有没有事
对于抗风疹病毒igg定量这个问题你一定要给予了解重视，关于你请问的抗风疹病毒igg定量这个问题我来为你解答如下：怀孕3个月检测风疹、巨细胞病毒抗体目的是预防胎儿发育畸型、缺陷。风疹、巨细胞病毒抗体IgM阴性，IgG分别为72.8、5.00,说明你妻子体内对风疹、巨细胞病毒有免疫力，不会感染患上疾病，也不会危害胎儿的发育；从常规化验结果来说，IgG抗体滴度越高，说明免疫力强。间隔一个月后化验，化验结果也是阳性，但结果比上一次的增多。证实了上一次的化验结果，这是很好的现象。解释一下第二次结果升高的原因：目前，我国采用酶联免疫吸咐实验方法测定人体机体的免疫力，这方法由于受到人体因素、化验人员、检测试剂等原因的影响会出现检测结果有偏差现象。如孕妇身体变化很大，血液一些成份有所改变或浓缩（稀释），会影响到检测结果，检测IgG抗体滴度出现增高（降低）属于正常现象。还有不同厂家的检测试剂、不同的化验人员操作等也会出现有偏差现象，这些偏差是在质量控制之下是正常现象；假如第二次IgG抗体滴度出现阴性的话就说明出现检测质量事故。是要追究责任的。第二次结果增高说明：第一，证实第一次结果的正确性；第二，孕妇对疾病有免疫力；第三，各种因素可能出现结果偏差，但偏差不大，结合两次结果来说，是可信的；第四，对孕妇及胎儿是有益无害的。
什么叫错配pcr 利用错配pcr增加抗体亲和力的主要原理是什么？
列两篇相关文章的摘要,主要还是筛选抗体库.类似于进化论中的突变随机选择定向（如需要原文请提供电子邮箱）：
目的 :通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法 :以pscTNF质粒为模板 ,应用错配PCR构建突变抗体库 ,筛选亲和力得到改善的变种 ,再以所获变种为模板 ,用交替延伸PCR技术 ,再次构建突变库 ,筛选活性得到改良的克隆.以斑点ELISA方法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善.结果 :从错配PCR抗体库中筛选得到 7个活性有所增强的变种 ,再通过交替延伸PCR使这 7个变种的突变位点交换重组 ,获得了亲和力进一步提高的克隆.结论 :联合应用错配PCR和交替延伸PCR法可提高单链抗体亲和力.
目的:采用错配PCR和DNA改组技术制备抗肝癌单链抗体.方法:联合采用错配PCR和DNA改组技术随机突变抗肝癌单链抗体A4-16重链和轻链可变区,构建抗肝癌噬菌体抗体次级突变库,利用噬菌体展示技术从中筛选出高亲和力单链抗体突变株.结果:抗肝癌噬菌体抗体次级突变库容为4·5×107,经过3轮富集筛选和ELISA鉴定获得2株突变株M25、M36,不仅保留原始克隆的特异性,而且相对亲和力指数分别为原始克隆的2倍和2·4倍.结论:错配PCR结合DNA改组技术是提高单链抗体亲和力的一种有效的手段.
可用于elisa的抗体有哪些类型
ELISA的类型ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗菌素原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合物"（conjugate）；（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型：2.2.1 双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1） 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2） 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3） 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4） 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同（参见1.3.2，图1-4），如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被称为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的最高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗体和酶标抗体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab"）或Fab片段作酶结合物的试剂，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响，已被列为这类试剂的一项考核指标（参见6.2）。双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。2.2.2 双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。2.2.3 间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法（见图2-3）。操作步骤如下：1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。2）加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。3）加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体，但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。4）加底物显色本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果，但应尽可能予以纯化，以提高试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血清发生反应的杂质，例如以E.Coli为工程酶的重组抗原，如其中含有E.Coli成份，很可能与受过E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质，例如来自人血浆或人体组织的抗原，如不将其中的Ig去除，试验中也发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白，也会因竟争吸附而影响包被效果。间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性。病人血清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强，非特异IgG可直接吸附到固相载体上，有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中，抗原包被后一般用无关蛋白质（例如牛血清蛋白）再包被一次，以封闭（blocking）固相上的空余间隙。另外，在检测过程中标本须先行稀释（1:40~1:200），以避免过高的阴性本底影响结果的判断。2.2.4 竞争法测抗体当抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化抗原时，可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。2.2.5 竞争法测抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。2.2.6 捕获包被法测抗体IgM抗体的检测用于传染病的早期诊断(early diagnosis)中。间接法ELISA一般仅适用于检测总抗体或IgG抗体。如用抗原包被的间接法直接测定IgM抗体，因标本中一般同时存在较高浓度的IgG抗体，后者将竞争结合固相抗原而使一部份IgM抗体不能结合到固相上。因此如用抗人IgM作为二抗，间接测定IgM抗体，必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理，以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgM时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相，以捕获血清标本中的IgM（其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM）。然后加入抗原，此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用，呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断(early diagnosis)。甲型肝炎病毒（HAV）抗体的检测模式见图2-7。类风湿因子（RF）同样能干扰捕获包被法测定IgM抗体，导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐，用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。2.2.7 ABS-ELISA法ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量60000，每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物，分子量244。用化学方法制成的衍生物素-羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物，标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性，其亲和力较抗原抗体反应大得多，两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4个生物素分子结合，因此如把ABS与ELISA法可分为酶标记亲和素-生物素（LAB）法和桥联亲和素-生物素（ABC）法两种类型。两者均以生物素标记的抗体（或抗原）代替原ELISA系统中的酶标抗体（抗原）。在LAB中，固相生物素先与不标记的亲和素反应，然后再加酶标记的生物素以进一步提高敏感度。在早期，亲和素从蛋清中提取，这种卵亲和素为碱性糖蛋白，与聚苯乙烯载体的吸附性很强，用于ELISA中可使本底增高。从链霉菌中提取的链霉亲和素则无此缺点，在ELISA应用中有替代前者的趋势。由于ABS-ELISA较普通ELISA多用了两种试剂，增加了操作步骤，在临床检验中ABS-ELISA应用不多。
抗原抗体反应原理及影响因素是哪些？
抗原抗体反应原理：抗原决定簇与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性；抗原决定簇与抗体超变区的沟槽分子表面的结合；抗原表位与抗体超变区必须紧密接触，才可能又足够的结合力。抗原抗体反应影响因素：（一）反应物自身的因素 抗体：不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂.等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应.抗原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果.颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象.（二）反应环境条件 酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行.蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点.抗原抗体反应一般在pH6～9进行,有补体参与的反应pH为7.7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应.温度：在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速.一般为15℃～40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏.每种试验都有其独特的最适反应温度要求.此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应.为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液.
